血凝相关性

小桔灯提供知识库服务。本周，我们将分享第八部分，8。生化检测。今天，我们将提到与凝血、底物染色、免疫学、干化学、免疫比浊法和其他临床和生化检验相关的项目-血凝相关检测

血凝相关检测是什么？

血液凝固(凝血)

形态学：血液从液态变成凝胶态。

本质：纤维蛋白原(可溶性)变成纤维蛋白(不溶性)。

基础理论：凝血级联反应理论(血液凝固是一系列凝血因子的酶反应过程；每个凝血因子都被其前一个因子激活；最后，活化凝血酶原生成凝血酶；凝血酶将纤维蛋白原转化为纤维蛋白，形成纤维蛋白凝块。

原发性止血：指血管和血小板参与原发性血栓形成的凝血过程(血管期、细胞期)。

第二阶段止血：通过血浆凝血因子的连续酶解激活，最终生成凝血酶，形成纤维蛋白的凝固过程(血浆阶段)。

换句话说，血液在体内流动是因为凝血和抗凝血、纤溶和抗纤维之间存在平衡。

例如，假设血管受伤，首先血管收缩，血小板附着，形成一级止血；同时激活凝血因子形成纤维蛋白，与血小板一起在伤口处形成止血，即二次止血。

到目前为止，已证实参与凝血过程的因子有14种，除Ca外，均为蛋白质。

正常血液，除了组织因子，都可以在血浆中找到。除激肽系统外的凝血因子均以罗马数字命名，其中Ca为。在书写和拼写中，Ca不叫；纤维蛋白也不叫因子I。

合成部位：大部分主要在肝脏、其他内皮细胞和巨核细胞。

VitK依赖性因子：在缺乏VitK的情况下，形成的因子没有凝血活性，即在缺乏VitK的情况下，因子、、、的活性降低。

接触系统因素：通过这些因素与固体表面接触活化。因子，PK，HMWK。

凝血酶敏感因子：这部分因子对凝血酶特别敏感。因素一、五、八、十三。

了解了凝血因子，我们来看看如何理解& quot顺序激活& quot。

众所周知，多米诺骨牌，只要你用很小的力推第一张牌，那么第一张牌会推第二张牌，第二张牌会推第三张牌，然后推到底。同样，凝血因子就像一系列多米诺骨牌，比如右边的因子XII，激活后可以激活因子XI，直到纤维蛋白形成。

因此，凝血酶激活是一系列的酶激活过程，而不是单因素反应。

凝血系统中有两条途径，这两条途径都能导致纤维蛋白的产生，称为内源性和外源性途径。

内源性途径：指所有参与凝血的因子都来自于正常血液中存在的凝血蛋白和ca++。

外源性途径：指参与凝血的因子不完全来自正常血液，部分由组织进入血液。

我们把上图简化一点变成这张图。

这张图中的绿色区域是常见的方式，主要包括I、II、V、X因子的作用过程。

紫色区是外源途径的一部分，主要包括TF和VII因子。

模拟外源性途径开始凝血直至纤维蛋白形成的凝血过程是我们常规检测的PT。因此，PT的延长或缩短表明外源性途径因子的活性降低或增加。

同样，APTT也是如此。

TT是纤维蛋白原在凝血酶的作用下形成纤维蛋白的过程。因此，TT的延长表明纤维蛋白原的减少或功能缺陷，或抗凝剂的增加。

纤溶产生继发性纤溶的标志性产物DD，所以DD的升高表明继发性纤溶的存在。

抗凝血系统

抗凝血酶

蛋白质c系统

组织因子途径抑制剂(TFPI)

病理性抗凝蛋白(肝素样物质、狼疮抗凝物质(LA)、凝血因子抑制剂)

纤维蛋白溶解

纤溶酶原(PLG)在纤溶酶原激活剂(PA)的作用下转化为纤溶酶(PL)，进而降解纤维蛋白原和其他蛋白质。

因此，机体的止血和凝血功能主要由血管、血小板、凝血因子、抗凝剂和纤溶系统来完成。

止血功能主要涉及血管和血小板；

凝血功能主要由凝血因子参与；

抗凝功能主要涉及抗凝物质和纤溶系统。

血凝相关检测都是什么项目？

活化部分凝血活酶时间(APTT)

凝血酶时间(TT)

血浆纤维蛋白原

抗凝血酶(AT-)

纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物(FDP)

纤溶酶原活性(PLG)

D二聚体

血凝相关检测项目的临床意义

PT是筛选外源性凝血系统(、、、)和口服抗凝剂量(如华法林、双香豆素)的检测项目。

1.参考距离

凝血酶原时间(PT):10-14s患者超过正常对照3s以上，结果异常。

凝血酶原比率(%): 0.8-1.3

国际标准化比率：0.85-1.3

2.PT扩展：

凝血因子、、和先天性缺乏；低(无)纤维蛋白原；获得于急性DIC消耗性低凝血期，原发性纤溶，维生素K缺乏，广泛而严重的肝实质损害(如急性重型肝炎和肝硬化)，

3.PT缩短：

见于先天性凝血因子V增多、口服避孕药、高凝状态（DIC早期、急性心肌硬塞等）、血栓性疾病（脑血栓形成、急性血栓性静脉炎）、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后等

4.监测口服抗凝药（如华发令、双香豆素等）的重要指标

一般要求PT：18-24SINR：2.5-3.5，不同疾病不同值。

口服抗凝剂“华发令”，预期值约为参考值的2倍，PT活动度参考值为75%-120%，降低到＜40%可能有出血倾向。

（二）活化部分凝血活酶时间--APTT

APTT常用于内源性凝血系统（Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子）的筛选及肝素抗凝治疗的监测。

1.参考范围：

20-35s（患者结果超过正常对照10s以上为异常）

2.APTT延长：

见于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子Ⅷ、Ⅺ、Ⅻ缺乏、VWF等）；多种凝血因子缺乏（如严重肝病、维生素K缺乏、DIC、纤溶亢进等）；血液中有抗凝物质存在

3.APTT缩短：

见于凝血因子Ⅷ、Ⅹ活性增高、血小板增多症、高凝状态（DIC高凝期）、不稳定性心绞痛、脑血管病变、糖尿病血管病变、脑梗塞、深静脉血栓、妊趁高血压综合症和肾炎综合症，静脉穿刺不顺利混入组织液

4.是监测肝素治疗的首选指标：

肝素抗凝治疗中APTT的预算期为正常值的1.5-2.5倍

（三）凝血酶时间--TT

1.参考范围：14-21s

2.TT延长：

见于原发性或继发性纤溶亢进（如DIC）时，故TT是一项常用的纤溶活性筛选实验；另外，普通肝素治疗或血栓性疾病溶栓治疗时，TT也显著延长

3.TT缩短：

常见于血样本有微小凝块或钙离子存在及PH呈酸性时

（四）血浆纤维蛋白原--Fbg

1.参考范围：2-4g/L

2.Fbg含量增高：

Fbg是急性时项反应蛋白，也是红细胞沉降速率增快的主要血浆因素。在组织坏死和炎症时，Fbg在24小时内增高数倍；妊娠和使用激素，冠状动脉粥样硬化性心脏病，脑血管病，糖尿病，恶性肿瘤等，Fbg均可增高

3.Fbg含量减少：

肝脏疾病(重症肝炎，慢性肝炎，肝硬化等);DIC消耗性低凝血期及纤溶期，原发性纤维蛋白原缺乏症，原发性纤溶活性亢进，恶性贫血及肺、甲状腺、子宫、前列腺手术等

（五）抗凝血酶--AT-Ⅲ

1.参考范围：75-135%

2.AT-Ⅲ是血浆中最重要的生理性抗凝物质，约占血浆中总抗凝血酶活性的50%-70%。肝素作用于AT-Ⅲ的赖氨酸残基而使抗凝血酶活性增强1000倍。

3.AT水平减低：

AT缺乏是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一，但与动脉血栓形成关系不大

遗传性AT缺乏：遗传性AT缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病

获得性AT缺乏：

（1）合成降低，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝

癌晚期等

（2）丢失增加，见于肾病综合征

（3）消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如心脑血管疾病、DIC、脓毒血症、外科手术后、深静脉血栓形成、肺梗死、妊高症等

4.AT水平增高：

在血友病、口服抗凝药物、使用黄体酮类药物时，AT水平增高

（六）纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物--FDP

1.参考范围：<5μg/mL

2.FDP增高：

见于原发性纤溶症、DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞白血病、肺栓塞、深静脉血栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植的排斥反应、溶栓治疗等

（七）纤溶酶原活性--PLG

1.参考范围：75-150%

2.PLG增高：

表明纤溶活性减弱，见于血栓前状态或血栓性疾病

3.PLG降低：

表明纤溶活性增高，见于肝病、DIC及治疗性纤溶等患者

（八）D-二聚体–D-D

1.参考范围：0-550μg/L

2.D-二聚体广泛应用于血栓疾病的诊断和溶栓治疗的监测。其水平升高多见于深静脉血栓（DVT）、肺栓塞（PE）、弥散性血管内凝血（DIC），另外，妊娠时D-二聚体也有升高，但很高的D-二聚体水平则预示伴有并发症，如先兆子痫。

血凝相关检测项目的常见问题及解决方法

（一）标本质量常见问题

1.标本采集为3.2%柠檬酸钠0.3ml+静脉血2.7ml，采血量过多或过少会影响检测结果的准确性

2.凝血、溶血、高血脂标本会影响检测结果的准确性

解决方法：

对抗凝剂不符合，采血量不准确，凝固，溶血，脂血标本

（二）标本运输与保存

1.标本应戴盖运输与存放

2.全血标本2小时内离心，；离心条件为3000r/min×15min；4小时之内检测

3.标本储存的时间

2~8℃<4小时

-20℃<2周

-70℃<6个月

如果标本放置时间过长，会使检测结果受到影响

（三）危急值报告

1、凝血酶原时间（PT）>25S

2、凝血酶原国际标准化比率（INR）>4.5

3、活化部分凝血活酶时间（APTT）>70S

4、纤维蛋白原定量（Fbg）<1.0g/l

（四）标本采集制备注意事项

1.抗凝剂的选取及用量

1.1抗凝剂的选取：以选用肝素作为抗凝剂为宜。草酸盐或枸橼酸钠等可引起细胞皱缩，影响红细胞的聚集性和变形能力，导致血液粘度增高，故不宜使用。

1.2抗凝剂的用量要适量：

☆注意：抗凝剂用量不可过大，尽量减少对血液的稀释作用；抗凝剂用量不可过小，否则达不到抗凝效果。

2.样本的采集

2.1时间:一般宜清晨空腹安静状态下采血。

2.2部位:采血时，取坐位，取肘前静脉血。

2.3采血时尽可能缩短静脉阻滞时间，针头刺入血管后，立即松开压脉带，安静约5秒再开始采血。

2.4采血过程不宜太快，应避免剪切力对红细胞可能造成的损伤。为此，采血针头的内径以较大为好(最好选用7号以上的针头)。采血时抽力不宜过大，以免血液流经针头时受到异常的剪切力。

2.5标本混匀：采血后，旋下注射针头，将血液沿试管壁缓慢注入试管中，然后用手握住试管中部搓动或在桌面上做圆周滑动，以使血液充分和抗凝剂混匀，以免凝血，但要避免剧烈振摇，以免溶血。

3.样本放置

3.1放置温度：标本不能在0℃以下保存，在冰冻条件下，将影响血液的生理状态和流变特性。所以，血样一般在室温(15℃－25℃)贮存。

3.2放置时间：在室温条件下标本一般在4小时内完成测试工作，但若取血后立即进行测试，则所测结果偏低，因此，取血后静置20分钟后进行测定为适宜。

3.3标本不能在0℃以下冰冻保存。特殊情况血样必须延长存放时间时，应将标本放入4℃冰箱中，保存时间一般不超过12小时。存放标本在测试前要充分摇匀，在结果报告中应注明保存条件。

血凝相关检测项目的检测方法

1、Prothrombintime（PT）-凝血酶原时间测定（外源性凝血途径检测）。

2、ActivatedPartialThromboplastinTime（APTT）-活化部分凝血活酶时间测定（内源性凝血途径检测）。

3、ThrombinTime（TT）-凝血酶时间测定（共凝血途径检测）。

4、特殊物质检测（检测引起凝血功能异常的原因）：Fibinogen（FIB）-纤维蛋白原测定。

以上即为血凝常规四项检测。PT、APTT、TT为定性检验，FIB为定量检测。

血凝相关检测项目的检测仪器-血凝仪

血液凝固分析仪（automatedcoayulationanalyzer,ACA）是采用一定分析技术，对血栓与出血有关成分自动检测的临床常规检验仪器

在血栓/出血实验室中最基本的设备就是血液凝固分析仪（简称血凝仪）。

血凝仪主要检测方法：凝固法、底物显色法、免疫学法、干化学法等。

1．凝固法原理

是通过检测血浆在凝血激活剂作用下发生一系列物理量（光、电、超声、机械运动等）的变化，再由计算机分析所得最终结果，称生物物理法。按测量原理分为电流法、超声分析法、光学法和磁珠法四种。

光学法（比浊法）：是根据血浆凝固过程中浊度的变化，导致光强度变化来测定相关因子。

双磁路磁珠法原理：测试杯的两侧各有一组驱动线圈，产生恒定的交替电磁场，使杯内去磁小钢珠保持等幅振荡运动；凝血激活剂加入后，随着纤维蛋白的增多，血浆黏稠度增加，小钢珠运动振幅逐渐减弱，将运动幅度衰减到50%时确定为凝固终点。

双磁路磁珠法与光学法原理主要区别：

前者是检测血浆凝固过程中磁电信号变化

后者是检测该过程中光信号的变化

2.底物显色法原理：实质为光电比色原理，是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性，也称生物化学法。

3.免疫学法原理以纯化的被检物质为抗原，制备相应的抗体，然后利用抗原抗体反应对被检物进行定性或定量测定。血凝仪使用免疫比浊法。

血凝相关检测项目的检测仪器-血凝仪对比

（一）血凝仪基本结构

1.半自动血凝仪基本结构

主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成。

2.全自动血凝仪基本结构

包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等。

（二）血凝仪评价

1.一般性评价：

①产品质量50%；

②价格25%；

③厂商评估10%；

④担保5%；

⑤售后服务5%；

⑥可接受性5%。

2.技术性能评价：

重复性测定、线性范围、准确性、携带污染率、干扰因素、可比性分析等几方面。

（三）血凝仪的特点

1.半自动血凝仪：

①手工加样加试剂；

②操作简便；

③应用检测方法少；

④价格便宜；

⑤速度慢；

⑥测量精度好于手工，但低于全自动

2.全自动血凝仪：

①自动化程度高；

②检测方法多；

③通道多，速度快；

④项目任意组合，随机性；

⑤测量精度好，易于质控和标准化；

⑥智能化程度高，功能多；

⑦价格昂贵；

⑧对操作人员的素质要求高

（一）半自动血凝仪的维护

①保持测试槽清洁，严禁有异物进入；

②避免阳光直晒和远离强热物体；

③防止受潮和腐蚀；

④仪器和加珠器都必须远离强电磁场干扰源；

⑤电源电压为220V±10％，最好使用稳压器；

⑥使用一次性测试杯及钢珠

（二）全自动血凝仪的维护

①清洗或更换空气过滤器；

②检查及清洁反应槽；

③清洗洗针池及通针；

④检查冷却剂液面水平；

⑤清洁机械运动导杆和转动部分并加润滑油；

⑥及时保养定量装置；

⑦更换样品及试剂针；

⑧数据备份及恢复等

小编将会在知识文库生化专栏

陆续为大家数字解析当前热门生化项目哦，尽情期待。